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本发明公开了一种能识别磺胺类的特异性单克隆抗体,本发明的单克隆抗体是由杂交瘤细胞4E5所分泌的,该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:C201148。本发明还公开了特异性单克隆抗体、包被原、免疫原的制备方法和酶联免疫检测方法及酶联免疫分析检测试剂盒。与现有技术相比,本发明制备得到的单克隆抗体可识别多种磺胺类药物,本发明的酶联免疫检测方法及试剂盒具有简便、快速、灵敏、准确等优点。