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本发明公开了一种基于酶催化反应测定过氧化氢的方法。在12支10mL比色管中都加入0.0~2.0mL pH=4.2克拉克 鲁布斯缓冲液、0.1~1.5mL 0.05mol/L碘化钾和0.0~1.2mL 2.0×10 6 mol/L牛血红蛋白,然后依次加入0.0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5mL 6.40×10 5mol/L H2O2溶液,反应20分钟后,再在每支管中加入0.1~0.7mL 2.38×10 4mol/L纳米银,用二次蒸馏水定容,继续反应10分钟后,用1cm石英比色皿,以λex=λem的方式扫描共振散射光谱;在430nm处分别测定加有H2O2溶液的散射强度I430nm和不加H2O2的试剂空白的散射强度I0,计算差值ΔI430nm=I0 I430nm。另取池塘水或新鲜雨水过滤,同法测定其散射强度值,计算出池塘水或新鲜雨水中H2O2的含量。本发明测定方法选择性好、灵敏度高。