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本发明公开了一种胶体金试纸条,该试纸条由吸收垫、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫依次层叠粘贴在塑料衬板上构成,所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线,所述金标垫包被有胶体金标记的能识别新霉素、阿米卡星和巴龙霉素的单克隆抗体,所述检测线包被有新霉素包被原,所述质控线包被有羊或兔抗鼠IgG。本发明还公开了一种胶体金试纸条的使用方法及其在新霉素残留检测中的应用。本发明可用于对牛奶、鸡肉,猪肉、虾肉、牛肉、羊肉、猪肝等组织样品进行新霉素残留快速检测,最低检测限为500μg/L,特异性高,准确性好。。