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本发明公开了一种能特异性识别黄曲霉毒素M1的单克隆抗体,它是由杂交瘤细胞株AFM1/3D8所分泌的,所述的杂交瘤细胞株AFM1/3D8,保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:C201559。本发明还公开了检测黄曲霉毒素M1的酶联免疫方法与试剂盒。与现有技术相比,本发明制备的单克隆抗体只识别黄曲霉毒素M1,本发明的酶联免疫方法和试剂盒具有检测灵敏度、准确度高,精密度好,简便、快速等优点。