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本发明公开了一种三叶青藤的组织培养快速繁殖方法,包括以下步骤:1)以三叶青藤的带芽茎段为外植体,接种于繁殖复壮一体化培养基,置于培养室内培养15d,室内条件为22 26℃,1400lux,8h/d,然后转入25 28℃,3500 4500lux的自然光照条件下继续培养15d,获得丛生芽;2)将步骤1)培养得到的丛生芽接种到生根炼苗同步化培养基中,于室内22 26℃,1500lux,10h/d的条件下培养7d,再转入大棚内23 28℃、遮光度为20 40%、相对湿度为60 80%的自然光下培养25d;3)移栽。本发明的方法能显著缩短种苗生产周期,降低种苗生产成本,提高种苗成活率与种苗质量。